Viabilidade do recongelamento de espermatozóides humanos. Int Braz J Urol, vol 29, Suppl. Special, pág. 23, September-October 2003.

Viabilidade do recongelamento de espermatozóides humanos

Verza Jr, S., Venturini, M.F.R, Esteves, S.C.

ANDROFERT, Centro de Referência em Infertilidade Masculina, Campinas – SP

Objetivo: Avaliar a viabilidade do recongelamento de sêmen humano utilizando a técnica de vapor de nitrogênio líquido com fases estáticas.

Material e Métodos: Foram descongeladas 20 amostras de 16 indivíduos que solicitaram descarte do sêmen criopreservado, sendo 6 portadores de câncer e 10 que haviam armazenado sêmen para utilização no programa de reprodução assistida. Para o descongelamento, as amostras foram retiradas do nitrogênio líquido, permanecendo 5 minutos à temperatura ambiente e 20 minutos à 37° C. Uma alíquota de cada amostra foi removida para a análise da concentração de espermatozóides móveis, motilidade percentual total e progressiva e vitalidade de acordo com os critérios da O.M.S., e morfologia espermática pela técnica estrita de Kruger. Todas as amostras foram recongeladas pela técnica de vapor de nitrogênio líquido com fases estáticas, de maneira idêntica à utilizada no congelamento inicial, porém sem a nova adição de meio crioprotetor (TEST yolk buffer, com glicerol – Irvine Scientific, EUA). Após 72 horas, foram novamente descongeladas pela técnica já descrita, e os mesmos parâmetros foram analisados. Para análise estatística, foi utilizado o teste não-paramétrico de Wilcoxon, com nível de significância de 0,05, com o intuito de comparar os parâmetros espermáticos entre o 1° e o 2° descongelamento.

Resultados: Para todos os parâmetros analisados, observou-se decréscimo significativo entre o 1º e o 2º descongelamento. A concentração de espermatozóides móveis diminuiu de 5,8 x 10 6 /ml para 1,9 x 10 6 /ml (p<0,01); motilidade percentual total de 38,3% para 20,2% (p<0,01); motilidade percentual progressiva de 28,4% para 11,5% (p<0,01); vitalidade de 38,7% para 19,3% (p<0,01); e morfologia de 5,3% para 4,3% (p=0,03). Não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos câncer e reprodução assistida, tanto após o 1º quanto o 2º descongelamento.

Conclusão: O recongelamento de amostras de sêmen humano pela técnica de vapor de nitrogênio líquido com fases estáticas possibilita a recuperação de espermatozóides viáveis, oferecendo assim uma alternativa a mais para pacientes que não dispõem de tempo hábil para coletas seriadas. Neste estudo, observou-se que em 100% dos casos houve recuperação de espermatozóides móveis após o 2º descongelamento. Outros estudos fazem-se necessários para a avaliação do potencial fértil destas amostras.